子宫肌瘤临床表现为月经过多,经期延长,周期缩短,或不规则子宫出血,常会伴有不同程度的贫血。中医认为,脏腑不合,气滞血瘀,冲任失调是本病的主要原因,临床上可以辨证分型治疗。本病是以子宫出血为主要临床症状,病久失血,而导致气血两虚,在治疗时,除出血期以化瘀止血、平时破瘀消外,还必须结合补益气血。对于瘕的治法,《内经》提出“坚者削之,结者散之,留者攻之,滞者导之”的原则;《女科经纶》:“善治瘕者,调其气而破其血,消其食而豁其痰,衰其大半而止”。 汉方医学已有数千年之历史,而且是累积经验的循证疗法之一,由于化学药物引起的药害,以及食品添加物或清洁剂引起的公害等,引起人们对利用自然药物的兴趣,纷纷把目光转向天然中药。依据汉方的思想,绝大多数的妇女疾病是属于体内“血”的异常,中医所谓的“血”,不单是指血液,也包括淋巴液或激素作用。中医对女性的生理及病理独具慧眼,其用药经验可以说是数千年来累积而成。 中药的运用是几千年来前人智慧结晶所在,其内容相当丰富且千变万化。从《内经》、《伤寒论》始,前人从药物的升降浮沉,四气五味,虚实补泻,脏腑归经,针对人体阴阳表里,寒热虚实,把数百种药物归纳,依据理论用于临床。 本研究已建立细胞模式,以期能从天然产物中找出明确具有治疗子宫肌瘤之中药,为医师临床用药提供参考,造福更多的妇女。
1 实验材料 1.1 中药材来源 本项研究所测试的中药材来自台北南京泰生堂参药有限公司,实验中药材见表1。 表1 单味药材50%酒精之萃取率 略 1.2 仪器 (1)回转式真空减压浓缩机 (Switzerland BUCHIRE 111 );(2)离心机Centrifuge 5415C (Eppendorf );(3)冷冻干燥机(Eyela; Cool Ace.CA-105 );(4)微量电子天秤(Shimazu, Libror ACF-200 );(5)显微镜(Olympus, Tokyo );(6)二氧化碳培养箱(Espec BNA-211 );(7)血细胞计数器(Hemocytometer; Bright-line );(8)组织培养角瓶(Corning );(9)组织培养皿(Falcon ) ;(10)96-Well组织培养盘(Corning );(11)微量吸管(Biohit );(12)高温灭菌器(Tomin 1 Medical Equipmene Co,LTD; TM-325);(13)过滤膜(Coming );(14)-80℃冰箱(Enviromental Equip. Co; So-Low )。 1.3 子宫肌瘤细胞 由荣民医院妇产科提供病理检体。当患者在妇产科门诊,以内诊与超声波扫描确诊为子宫肌瘤,依临床路径安排入院手术治病者,以做本研究之素材。即由此类患者在手术切除后,立即切取肌瘤组织,放入转输液 (DMEM)中,送实验室做组织培养。 1.4 试药与试剂 1.4.1 培养液 (1)DMEM (Dulbecco’s Minimum Essential Medium ) ;(2)Fetal Bovine Serum (Hyclone: Cat No.1115-L );(3)Penicillin-Strepetomycin (Seromed: Cat No. 03-033-1B );(4)L-Glutamine (Seromed: Cat No.0020-1B );(5)NAA (Mem-Eagle Non-essential Amino Acids Solution );(6)L-Glutamine 200 mM (Gibco: Cat No. 25930-081) 。 1.4.2 染色剂 (1)Trypan blue (Sigma );(2)MTT: {3(4,5-dimethylthiazoled 1-2-y1)-2,5-dipheyl tetrasolium bromide } (Boehringer Mannheim GmbK Cat No. 1465 007 )。 1.4.3 一般化学药品 (1)DMSO (Merck, Germany, K23951931, Max 0.05% H2O );(2)Sodium Hydrogen Carbonate ( Merck, Germany,NaHCO3; Pro analysis );(3)Isopropanol (Merck, Germany )。 1.4.4 测试药品与酵素 (1)B-Estradiol (Sigma USA )E-2758 Lot 79H0941;(2)Progesteronl (Sigma USA )P-8783 Lot 80K0885;(3)Trypsin, 2.5% (Sigma USA )Lot 1077108;(4)Trypsin-EDTA (Sigma USA )Lot 1089908 ;(5)LSAB(Dako, Denmark, Code No. K0675 );(6)Monoclonal Anti-Human Progesterone receptors(Dako, Denmark, clone pgR 636, 1:50 )。 本篇论文共 6页,当前在第 2页 1 2 3 4 5 6
|